首先得到靶蛋白的mRNA，然后逆转录成cDNA，再把cDNA用PCR的方法扩增，得到的产物整合到表达载体上（该步为载体构建，载体可以是质粒，腺病毒或慢病毒等，一般可以委托公司构建，比如英骏公司构建的载体比较常见），再把构建的新载体用电转染、脂质体或磷酸钙的方法转至想要表达的细胞内，转染2天后就可以检测靶蛋白的表达（根据需要可以做成瞬时转染或稳定转染）
电转染实验时，应选择纯度高的质粒，首先DNA／RNA应该超纯(A260／A280>1．8)，其次应不含内毒 素，同时质粒应溶于双蒸水而不是TE缓冲溶液。另外，DNA浓度不宜过高。
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