蛋白质跑电泳想让小分子量跑出去,我的蛋白分子量为170kda,用的10%的分离胶,100v恒压跑

核心提示首先你分离胶的浓度有点小问题,跑的时间较长就行了啦,只不过要自己估摸着。。。但是跑蛋白一般都要分两拨电压跑啊。。效果好点(1)SDS-PAGE分离胶浓度 --- 最佳分离范围 (KD)6%胶 ---- --------50-1508%胶 -

首先你分离胶的浓度有点小问题,跑的时间较长就行了啦,只不过要自己估摸着。。。但是跑蛋白一般都要分两拨电压跑啊。。效果好点

(1)SDS-PAGE分离胶浓度 --- 最佳分离范围 (KD)

6%胶 ---- --------50-150

8%胶 ---- --------30-90

10%胶 ------------20-80

12%胶 ------------10-40

(2)分离胶浓度(%) --- 线性分离范围(KD)

15 ----- ------ --12-43

10 ---- ---------16-68

75 ------------36-94

50 ---- ------- -57-212

如何用实验证明抗体是免疫球蛋白求技术帝!给个大概的思路也好~

10毫安。根据查询相关公开信息显示,恒压200V电泳25h,开始时候控制电流为10mA左右。蛋白电泳(SPE)作为一种蛋白质的分析技术,蛋白质在缓冲液中带负电荷或正电荷,在电场中向阳极移动称为电泳。

请教关于蛋白电泳方面的问题

做一下免疫球蛋白电泳实验吧: 免疫电泳—免疫球蛋白鉴定 免疫电泳是将电泳与双向琼脂扩散相结合的一种抗原分析方法根据抗原中各蛋白质组分的电荷和分子量大小不同,在电场作用下有不同的迁移率,从而可将混合物中各种不同组分分开实验时,将被检抗原样品先放在琼脂板的小孔中进行电泳分离,再在其平行方向开槽,加入已知抗体,进行双向扩散当相应抗原、抗体比例合适时,即形成白色沉淀弧,根据沉淀弧的数量、位置和形态,即可分析样品中所含的抗原成分及其性质 二、器材与试剂 1.器材 电泳仪、电泳槽 打孔器、挖槽刀和图形卡 载玻片、定量吸管和吸耳球 毛细管 有盖搪瓷湿盒 煮沸水浴箱 2.试剂 (1)12%琼脂凝胶(2)生理盐水(3)抗原(4)抗体(5)pH86,005M巴比妥缓冲液 (三)操作步骤: 用定量吸管吸取热琼脂35ml,平铺于载玻片上待凝固后,按图形卡,用打孔器打孔,用针挑去孔内琼脂 用毛细管将抗原(血清)加入小孔中,将琼脂板放入pH86,005M巴比妥缓冲液的电泳槽中,两端用四层纱布搭桥,电泳时电压可调至110V,电泳45~60分钟 从电泳槽中取出琼脂板,用刀片按图在两孔之间挖一小槽,用针挑去槽内琼脂,在槽内加入抗抗全血清抗体 将载玻片置于搪瓷湿盒内,进行扩散24~48小时后观察结果 四、操作注意事项 浇载玻片时,琼脂面要尽量铺平 加样时应一次加满,并防止样品溢出孔外 五、实验结果记录与分析 画出各孔间的沉淀线位置、数量、形态,并予以简要的说明

WEALTEC做DNA和蛋白质的电泳仪电源是通用的吗?

转膜的时间影响不太大,不知道你在什么条件下转膜这么短的时间(多大电压多大电流?室温还是低温?);

另一个关键还是调整好加样量,做到内参表达情况相同,再有就是优化一抗的用量,不可过大。

ELITE300PLUS属于基础款电泳仪,电压最高是300V,功率90W,跑垂直电泳、水平电泳、湿式转印都没有问题。我其实也用来跑过半干,也能用,但不推荐,因为半干一般需要用高电流电泳仪,用这个跑会有点吃力,只能跑很小一块胶。除了半干转印,ELITE300PLUS运行其他的电泳和转膜都是可以的。

 
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