半干法转膜电流一般是多少?

核心提示50kd左右,用的bio-red半干转膜仪,转膜缓冲液用是39mM甘氨酸,48mM Tris,20%甲醇,PVDF膜,严格按照转膜操作进行的,恒压12V的话,电流一开始就过小,只有0.02A,功率直接显示为零,转膜半小时都转不过去。今天试了

50kd左右,用的bio-red半干转膜仪,转膜缓冲液用是39mM甘氨酸,48mM Tris,20%甲醇,PVDF膜,严格按照转膜操作进行的,恒压12V的话,电流一开始就过小,只有0.02A,功率直接显示为零,转膜半小时都转不过去。今天试了恒流转,用了0.03A的电流,电压慢慢上升快超过25V,后来改用0.02A的电流,电压最大的时候达到22V。但是染色还是没有条带。预染marker基本上转过去了。将转过后的胶重新染色,胶上很明显的有我的蛋白。

 
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