1、消化:精密称取大豆样品1.0g左右，放入干燥的250 ml消化管中，加入0.4g CuSO4 7g K2SO4 10ml H2SO4先200'C炭化，待泡沫停止后提高温度到450'C，加热至液体沸腾，待瓶内液体呈蓝绿色透明后，再继续加热0.5h。
冷却后加入20ml水，移入100ml容量瓶中，用少量水洗涤消化管2~3次，洗液合并于容量瓶中定容。
2、蒸馏:连接凯氏定氮装置，于水蒸气发生瓶内装水至2/3处，加甲基红指示剂数滴及数ml硫酸，保持水呈酸性。加入数粒玻璃珠以防暴沸，调节火力加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。
3、向吸收瓶内加入20g/L硼酸溶液20ml及混合指示剂2滴，并使冷凝管下端插入液面以下，吸取10ml样品消化稀释液由进样口进入反应室，并以10ml水洗涤进样口使其流入反应室内，将400g/L NaOH溶液10ml倒入进样口，立即夹紧螺旋夹，并加入少量蒸馏水，密封进样口。
当蒸汽通入反应室时，准确计时，反应产生的氨气通过冷凝管进入吸收瓶，蒸馏5min，移动吸收瓶，使冷凝管下端离开液面，再蒸馏Imin，然后用少量水冲洗冷凝管下端外部，取下吸收瓶。
停止加热，使反应室内的液体进入汽水分离器，打开进样口的螺旋夹，将汽水分离器的液体放出。再向反应室内加入蒸馏水，夹紧螺旋夹，再次进行加热至水蒸汽放出，停止加热，使反应室内的水进入汽水分离器，进行洗涤。
4、滴定:用0.025mol/L硫酸标准溶液滴定吸收液至灰色。
5、计算:X= 2cVX 14X5.71/m
X为样品中蛋白质的含量，%；c为硫酸标准溶液的浓度，molL；V为样品消化液消耗硫酸标准溶液的体积，ml；m为样品的质量，g。
注意事项
(1) 样品应是均匀的。固体样品应预先研细混匀，液体样品应振摇或搅拌均匀。
(2) 样品放入定氮瓶内时，不要沾附颈上。万-沾附可用少量水冲下，以免被检样消化不完全，结果偏低。
(3) 消化时如不容易呈透明溶液，可将定氮瓶放冷后，慢慢加入30%过氧化氢(H2O2)2-3ml，促使氧化。
(4) 在整个消化过程中，不要用强火。保持和缓的沸腾，使火力集中在凯氏瓶底部，以免附在壁上的蛋白质在无硫酸存在的情况下，使氮有损失。
(5)如硫酸缺少， 过多的硫酸钾会引起氨的损失，这样会形成硫酸氢钾，而不与氨作用。因此，当硫酸过多的被消耗或样品中脂肪含量过高时，要增加硫酸的量。
(6)加入硫酸钾的作用为增加溶液的沸点，硫酸铜为催化剂，硫酸铜在蒸馏时作碱性反应的指示剂。
(7)混合指示剂在碱性溶液中呈绿色，在中性溶液中呈灰色，在酸性溶液中呈红色。如果没有溴甲酚绿，可单独使用0.1%甲基红乙醇溶液。
(8) 氨是否完全蒸馏出来，可用PH试纸试馏出液是否为碱性。
扩展资料：
凯氏定氮法原理
凯氏定氮法首先将含氮有机物与浓硫酸共热，经一系列的分解、碳化和氧化还原反应等复杂过程，最后有机氮转变为无机氮硫酸铵，这一过程 称为有机物的消化。
为了加速和完全有机物质的分解，缩短消化时间，在消化时通常加入硫酸钾、硫酸铜、氧化汞、过氧化氢等试剂，加入硫酸钾可以提高消化液的沸点而加快有机物分解，除硫酸钾外，也可以加入硫酸钠、氯化钾等盐类类提高沸点，但效果不如硫酸钾。
硫酸铜起催化剂的作用。凯氏定氮法中可用的催化剂种类很多，除硫酸铜外，还有氧化汞、汞、硒粉、钼酸钠等，但考虑到效果、价格及环境污染等多种因素，应用最广泛的是硫酸铜。
参考资料：
品名 规格 产地/牌号 参考价 日期
1#镁锭 ≥99.95% 鹤壁、闻喜 17900-18100(元/吨) 2月28日
2#锑锭 ≥99.65% 云南、广西 95000-96000(元/吨) 2月28日
1#锑锭 ≥99.85% 河南、广西 96000-97000(元/吨) 2月28日
0#锑锭 ≥99.91% 国产 97000-98000(元/吨) 2月28日
电解锰 ≥99.7% （袋装）重庆、湖南、青海 20400-20800(元/吨) 2月28日
电解锰 99.7% (桶装) 重庆、湖南、青海 21400-21800(元/吨) 2月28日
0#镉锭、条≥99.995% 国产 30000-31500(元/吨) 2月28日
1#镉锭、条≥99.99% 进口 29500-30000(元/吨) 2月28日
电解钴 ≥99.8% 金川、赞比亚 315000-335000(元/吨)2月28日
精铋 ≥99.99% 国产 145000-146000(元/吨)2月28日
1#铬 ≥99.2% 99A进口、国产 81000-83000(元/吨) 2月28日
海绵钛 ≥97-98% 国产 58-61(元/千克) 2月28日
海绵锆 ≥99% 国产 165-175(元/千克) 2月28日
金属硅 553# 贵州、福建、云南 14200-14400(元/吨) 2月28日
金属硅 441# 贵州、福建、云南 14600-15000(元/吨) 2月28日
金属硅 3303# 云南、福建 15300-15800(元/吨) 2月28日
金属硅 2202# 云南、福建 16300-16800(元/吨) 2月28日
铟 ≥99.99% 湖南、葫芦岛 4000-4100(元/千克) 2月28日
钙98.5%还原（块） 国产 22000-24000(元/吨) 2月28日
钙 99%电解（块）国产 36000-42000(元/吨) 2月28日
1# 钨条 ≥99.95% 国产 330-360(元/千克) 2月28日
硒锭 ≥99.99% 国产、进口 1250-1300(元/千克) 2月28日
硒锭 ≥99.9% 国产 1210-1240(元/千克) 2月28日
硒粉 ≥99.99% 国产、进口 1240-1280(元/千克) 2月28日
硒粉 ≥99.9% 国产 1190-1230(元/千克) 2月28日
钾（工业级） ≥98.5% 国产 85000-95000(元/吨) 2月28日
钠（工业级） ≥99.7% 国产 15000-18000(元/吨) 2月28日
铌 ≥99% 上海 750-800(元/千克) 2月28日
钒 ≥99.5% 国产 2600-2800(元/千克) 2月28日
铪 ≥99% 国产 5000-6000(元/千克) 2月28日
镓 ≥99.99% 江苏 4200-4400(元/千克) 2月28日
铍 ≥99% 国产 5500-6000(元/千克) 2月28日
1#钼 ≥99.95% 国产 300-320(元/千克) 2月28日
金属锂 ≥99%工业级、电池级 新疆 380000-430000(元/吨) 2月28日
碲 ≥99.99% 国产 2150-2200(元/千克) 2月28日
锗锭 50 Ω/cm 上海隆泰 9300-9500(元/千克) 2月28日
铼 99.99% 国产 60000-65000(元/千克) 2月28日
金属砷 ≥99.5% 国产 9400-10200(元/吨) 2月28日
