鲎能吃吗？

不能吃了，现已纳入国家保护动物，而且鲎是有毒的。

鲎肉内含有一种大分子非特异蛋白致敏性物质，吃鲎可引发皮肤过敏性斑疹、红肿和瘙痒，严重时导致过敏性休克或致死性毒性反应，中毒的死亡率较高。这种现象早在1988年《中国海洋药物杂志》第三期，由广西海洋研究所梁广耀等人报道的“广西沿海鲎类毒性调查初报”情况相一致。

扩展资料：

一、濒危原因

1、作为医药被利用：用鲎血细胞制成试剂，可以快速而灵敏检测内毒素，中国鲎是鲎试剂的主要来源之一，因此被大量猎杀。

2、作为食物被利用：中国鲎在其分布地成千上万地被捕捞，销往全国各地，并被当成盘中餐，资源严重减少。

二、广西中国鲎保护区

2009年3月，广西渔政部门在检查中发现，滥捕滥杀这种珍贵动物的现象在沿海地区非常严重。中国鲎的数量正在急剧减少。

由于北海水质好，无污染，特别适合中国鲎生存，有关部门正在筹划建立一个中国鲎保护区。

国外文献表明至少有11种迁徙鸟类及部分鱼类以鲎卵为主要食物，因此鲎也是生态链的重要组成部分。如果鲎数量减少，将对生态造成一定影响。部分生物学家及鲎试剂厂家等已向国家建议设立鲎保护区及立法保护鲎。

－鲎

细菌内毒素不同实验条件对结果的影响

内毒素干扰试验一定要两个厂家的试剂和三个连续批号

细菌内毒素干扰试验 按表1制备溶液A、B、C和D，使用的供试品溶液应为未检验出内毒素且不超过最大有效稀释倍数（MVD）的溶液，按鲎试剂灵敏度复核试验项下操作。只有当溶液A和阴性对照溶液D的所有平行管都为阴性，并且系列溶液C的结果在鲎试剂灵敏度复核范围内时，试验方为有效。按下式计算C和B的反应终点浓度的几何平均值（Es和Et）。 Es= 1g-1(∑Xs/4) Et= 1g-1(∑Xt/4) 式中Xs、Xt分别为系列溶液C和溶液B的反应终点浓度的对数值（1g）。 当Es在05λ-2λ(包括05λ和2λ)及Et在05Es-2Es (包括05 Es和2 Es)时，认为供试品在该浓度下无干扰作用。若供试品溶液在小于MVD的稀释倍数下对试验有干扰，应将供试品溶液进行不超过MVD的进一步稀释，再重复干扰试验。表1 凝胶法干扰试验溶液的制备 编号内毒素浓度/配制内毒素的溶液稀释用液稀释倍数所含内毒素的浓度平行管数A无/供试品溶液---2B2λ/供试品溶液供试品溶液1 2 4 82λ 1λ 05λ 025λ4 4 4 4C2λ/检查用水检查用水1 2 4 82λ 1λ 05λ 025λ4 4 4 4D无/检查用水---2注：A 供试品溶液；B干扰试验系列；C鲎试剂标示灵敏度的对照系列；D阴性对照。 可通过对供试品进行更大倍数的稀释或通过其他适宜的方法（如过滤、中和、透析或加热处理等）排除干扰。为确保所选择的处理方法能有效的排除干扰且不会使内毒素失去活性，要使用预先添加了标准内毒素再经过处理的供试品溶液进行干扰试验。 当进行新药的内毒素检查试验前，或无内毒素检查项的品种建立内毒素检查法时，须进行干扰试验。 当鲎试剂、供试品的配方、生产工艺改变或试验环境中发生了任何有可能影响试验结果的变化时，须重新进行干扰试验。

鲎试剂的工作标准品需要复核吗

细菌内毒素检查是一复杂的酶促反应过程，检查条件的任何变化都会对实验结果产生影响。中国药典附录”细菌内毒素检验法“项下明确规定：

1、反应温度37℃±1℃，时间60min±2min。反应时间与温度一定要严格控制好，否则会得出错误结论。如果反应温度或反应时间不足都会-----出现假阳性；同时反应温度或反应时间超出药典规定会-----出现假阴性。

2、药典规定该试验应在1万级环境内的100级区域下进行。然而对试验室温度要求在检查项下未做明确规定，但从中国药典凡例三十条4项下：除另有规定外应以25℃±2℃为准。

我本人认为试验环境没有必要控制在1万级环境内局部100级区域下进行，因这种环境反而易污染内毒素（原因：以前试验时污染的内毒素溶液挥发后易从风口吹出）。但实验室温度最好控制在20℃以下，这是一个酶促反应，温度对其影响比较大。

3、供试品溶液的pH值、离子浓度、鲎试剂的灵敏度及操作人员的操作水平等因素都会影响到试验结果。

因此，中国药典2015年版开始对“细菌内毒素检查”做了较大修改：

① 做“鲎试剂灵敏度复核”试验。该试验的目的不仅是考察鲎试剂的灵敏度是否准确，也是考察检验人员操作方法是否正确及实验条件是否符合规定的一次考核；

② “干扰试验”，当一个新的药品制订“质量标准”时或生产企业的原料来源、配方和生产工艺发生变化时都应做“干扰试验”；消除干扰的方法一般采用BET水稀释或加酸碱调节pH的方法消除干扰。其目的是确证供试品在该试验浓度及试验条件下对鲎试剂与细菌内毒素的反应无干扰作用。

③ 平时做“细菌内毒素检查”试验时，分别做：供试品2管；PPC2管；阳性对照2管；阴性对照2管。并且规定当阳性对照管、PPC管都为阳性且阴性对照管都为阴性时实验才可认为有效。否则，实验结果无效。

原因：如果阳性对照管不是阳性，=====出现该问题的原因最大可能性是出在“细菌内毒素标准溶液的制备”第一步，内毒素标准品或工作标准品加BET水复溶是很关键的一步，一定要按药典操作，既加BET水后在振荡器上振荡，15min，否则内毒素混合不均匀会出现这种清况；其次是更换不同批号或不同厂家的鲎试剂或BET水后，一定要做鲎试剂灵敏度复核试验，否则不知该批鲎试剂灵敏度及检查用水是否符合要求。-

--------阴性对照管不是阴性说明BET水有污染。

---------PPC管应显阳性，而未显阳性说明供试品或供试品稀释液在该试验条件下对试验有干扰。

如对细菌内毒素检查法感兴趣，你可以用“百度”搜索下近年来我在《中国药师》、《中国药业》、〈海峡药学〉等专业杂志上发表的有关细菌内毒素检查内容的文章，“得力生注射液细菌内毒素检查法的探讨”、“吡拉西坦细菌内毒素检查方法的建立”、“长春西汀葡萄糖注射液细菌内毒素检查法的研究”、“地塞米松磷酸钠原料药细菌内毒素检查法的建立”、“利巴韦林细菌内毒素检查法的建立”、“维生素C注射液细菌内毒素检查中干扰问题的探讨”等论文，以加深对该问题的理解。

鲎试剂的正确使用

标题：1目的2范围3职责4参考资料5定义6鲎试剂灵敏度的复核标题： 正文规范鲎试剂灵敏度复核的操作过程和要求，确保鲎试剂灵敏度复核结果的可靠性。适用于质监处药理室对鲎试剂灵敏度的复核。质监处药理室分析人员负责本规程的实施和完成相关记录。USP版附录85；CP版附录Ⅺ E 。细菌内毒素检查法：本法系利用从鲎的变形细胞中提取的试剂来检测或量化由革兰阴性菌产生的细菌内毒素，以判断供试品中细菌内毒素的含量是否符合规定的一种方法。细菌内毒素的量用内毒素单位(EU)表示。鲎试剂：是鲎变形细胞的溶出物经提取而成。鲎试剂灵敏度：在本检查法规定的条件下能检测出内毒素标准溶液或供试品溶液中的最低内毒素浓度，用EU/ml表示。细菌内毒素检查用水(BET水)：系指与灵敏度为003EU/ml 或更高灵敏度的鲎试剂在37 1 C 条件下24小时不产生凝集反应的灭菌注射用水。细菌内毒素标准品：USP细菌内毒素参考标准品(RSE)或已标定的细菌内毒素工作标准品(CSE)。反应终点浓度：是指系列递减的内毒素浓度中最后一个呈现阳性结果的浓度。一、试剂、材料与仪器设备试剂：鲎试剂 批号、灵敏度、规格、生产商。细菌内毒素检查用水(BET水) 批号、规格、生产商。细菌内毒素标准品 批号、效价、生产商。材料及仪器设备：电热恒温水箱 型号、设备编号。电热鼓风干燥箱 型号、 设备编号。漩涡混合器 型号。无热原试管 规格：10 75mm。正文无热原玻璃瓶 规格：25ml。无热原玻璃吸管 规格：1ml、2ml、5ml、10ml。试管架、无热原封口膜、洗耳球、酒精棉球、砂轮片。

标题：7鲎试剂的有效期8鲎试剂的保存9需复核的情况 二、试验准备试验所用的容器、用具都必须经过处理，250 C以上干烤至少1小时，以去除外源性内毒素。试验操作过程应避免微生物的污染。三、内毒素溶液配制细菌内毒素标准品系列溶液配制 取RSE或CSE 1瓶，按照使用说明书加入规定量的细菌内毒素检查用水使溶，并用漩涡混合器间歇混匀30分钟，然后用细菌内毒素检查用水进一步稀释至20 、 、 05 、 025 四个浓度的内毒素标准溶液，每一步稀释应混匀至少30秒钟。四、试验过程取被复核的鲎试剂原安瓿18支，分别用01ml细菌内毒素检查用水复溶。其中16支加入01ml细菌内毒素系列标准溶液，每浓度溶液平行做4支；另外2支加入01ml细菌内毒素检查用水作为阴性对照。将安瓿中的溶液轻轻混匀后，用封口膜封闭管口，垂直放入37 1℃电热恒温水箱中，保温60 2分钟。反应结果记录在鲎试剂灵敏度复核记录中。五、试验结果观察和有效性结果观察 将安瓿从电热恒温水箱中轻轻取出，缓缓倒转180°时，管内凝胶不变形，不从管壁滑脱者为阳性，记录为(+)； 凝胶不能保持完整并从管壁滑脱者为阴性， 记录为(–)。保温和拿取安瓿过程应避免受到振动造成假阴性结果。有效性 对于细菌内毒素标准品系列溶液，如果最大浓度20 管均为阳性，最低浓度025 管均为阴性，阴性对照管均为阴性，试验方为有效。六、灵敏度复核结果的计算计算公式为：c=lg-1(Σe/4)正文式中 e为细菌内毒素标准品反应终点浓度的对数值。合格标准 当05 ≤ c<13 时，方可用于细菌内毒素检查，并以标示灵敏度 为该批鲎试剂的灵敏度。鲎试剂有效期按厂家规定执行。鲎试剂应在2～10℃条件下保存。当鲎试剂的批号改变时需进行鲎试剂灵敏度的复核。

10相关记录 当细菌内毒素标准品的批号改变时需进行鲎试剂灵敏度的复核。鲎试剂灵敏度复核记录(表格编号：QCFP04-02)。

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QC-7129B鲎试剂灵敏度复核操作规程

标题：1目的2范围3职责4参考资料5定义6鲎试剂灵敏度的复核标题： 正文规范鲎试剂灵敏度复核的操作过程和要求，确保鲎试剂灵敏度复核结果的可靠性。适用于质监处药理室对鲎试剂灵敏度的复核。质监处药理室分析人员负责本规程的实施和完成相关记录。USP版附录85；CP版附录Ⅺ E 。细菌内毒素检查法：本法系利用从鲎的变形细胞中提取的试剂来检测或量化由革兰阴性菌产生的细菌内毒素，以判断供试品中细菌内毒素的含量是否符合规定的一种方法。细菌内毒素的量用内毒素单位(EU)表示。鲎试剂：是鲎变形细胞的溶出物经提取而成。鲎试剂灵敏度：在本检查法规定的条件下能检测出内毒素标准溶液或供试品溶液中的最低内毒素浓度，用EU/ml表示。细菌内毒素检查用水(BET水)：系指与灵敏度为003EU/ml 或更高灵敏度的鲎试剂在37 1 C 条件下24小时不产生凝集反应的灭菌注射用水。细菌内毒素标准品：USP细菌内毒素参考标准品(RSE)或已标定的细菌内毒素工作标准品(CSE)。反应终点浓度：是指系列递减的内毒素浓度中最后一个呈现阳性结果的浓度。一、试剂、材料与仪器设备试剂：鲎试剂 批号、灵敏度、规格、生产商。细菌内毒素检查用水(BET水) 批号、规格、生产商。细菌内毒素标准品 批号、效价、生产商。材料及仪器设备：电热恒温水箱 型号、设备编号。电热鼓风干燥箱 型号、 设备编号。

如何建立新药的细菌内毒素检查方法

内毒素检查法结果准确与否与所用鲎试剂的灵敏度相关性很大，而鲎试剂的灵敏度与它的正确使用又密切相关。所以，一定要严格执行鲎试剂的质量标准，规范使用鲎试剂。

保证所使用鲎试剂的质量 鲎试剂的质量主要表现在其灵敏度、自凝时间与成胶状态三个方面：灵敏度稳定;自凝时间不低于24h;具有一定的缓冲能力与合适的pH;反应后即形成坚实凝胶，将成胶安瓿翻转180°而不会被破坏。而质量稍差的鲎试剂存放一定时间后(如半年)其灵敏度可能发生变化，而灵敏度的改变会使测定结果所反映的供试品中内毒素的允许限值发生变化。因此，需选择具有国家颁发的批准文号,质量稳定的鲎试剂。

对鲎试剂灵敏度进行监测性复核 由于不同厂家鲎试剂质量不尽相同，即便是相同厂家不同批号的鲎试剂也有差异,这便导致鲎试剂灵敏度复核值与标示值不尽一致，因此鲎试剂的复核值对检测结果有显著影响。每使用新批号鲎试剂时应复核其灵敏度;对留样鲎试剂自生产之日起，每6个月进行一次灵敏度检测，其灵敏度在有效期内应符合规定。有研究表明，鲎试剂的灵敏度在符合标准规定及适当的贮存条件下,3年内其灵敏度变化不大，是稳定的。建议可适当延长其有效期。因此，对鲎试剂灵敏度进行监测性复核有利于确保实验的准确性，同时可以最大程度地使用鲎试剂。

使用过程正确操作 选择合适的操作方法与顺序，在鲎试剂的使用过程中尤为重要。在操作过程中要注意以下几点：(1)实验室要求洁净、无尘埃流通;检验人员同时注意卫生的保持。在整个使用操作过程中应防止微生物的污染，例如空气的流动，人员的口沫、汗液污染等。(2)鲎试剂开启、溶解和配制时应尽量避免将安瓿外瓶壁脏物、瓶壁碎片、砂轮锯屑等异物混入鲎试剂中，避免鲎试剂外损。(3)鲎试剂中含有多种蛋白质，用力振摇会产生气泡，一旦起泡难以消除，而影响检测的准确性，所以在整个操作过程中都要轻力以避免因过分震动而引起的误差。(4)量取和加样反应物时，一定要加到试管底部接近鲎试液而不接触鲎试液的管壁处。(5)生成凝胶的最适pH值为6～8，对于氯化钠注射液、葡萄糖注射液(5%,10%)等注射液，不需考虑供试液的pH值，而检查其他制剂时，尤其是一些本身缓冲能力较强或偏酸、碱的供试品，应考虑供试品的pH值。(6)使用时要严格控制温度和时间。当鲎试剂一加入内毒素及样品混合液中时反应已开始，并在一定的温度范围内，反应温度越高，反应速率越大;保温时间的增长，也会提高鲎试剂的灵敏度，增加假阳性的发生，导致较大误差。因此，要注意控制温度的变化和保温时间。(7)保持实验器具的洁净。每次检验完毕，应及时将玻璃器具充分清洗后于250℃干热灭菌处理，待烤箱温度升至设定的温度后开始计时，干烤至少1h。也可用其他经确证不干扰细菌内毒素的检查的适宜方法。对于塑料、橡胶等不耐热器材可用30%双氧水浸泡4h，用无热原水冲洗，70℃干燥备用。

鲎试剂的贮存 虽然冻干的鲎试剂在常温条件下是相对稳定的，但还是应存放在2℃～8℃下，避免长时间放置在高于25℃的温度条件下导致因贮藏不当、质量下降而引起的检验误差。

鲎是不是保护动物 它吃什么？

　[摘要] 目的：建立新药的细菌内毒素检查方法。方法：采用鲎试验检查法对新药中的细菌内毒素进行检查。结果：介绍了如何建立新药的细菌内毒素检查方法，重点是细菌内毒素检查限值的确认以及如何进行干扰试验。结论：细菌内毒素检查法为新药的质量控制以及应急检验提供了有益的基础。

[关键词] 新药；细菌内毒素检查法；干扰试验

[中图分类号] R92712 [文献标识码] B [文章编号] 1673-7210（2011）11（b）-159-03

How to establish the method of bacterial endotoxin test for new drugs

XIAO Guinan, SUN Qingping, SHENG Yingmei

Guangdong Institute for Drug Control in Guangdong Province, Guangzhou 510180, China

[Abstract] Objective: To establish the method of bacterial endotoxin test for new drugs Methods: Tachepleus amebocyte lysate test was applied to detect bacterial endotoxins in new drugs Results: How to establish the method of bacterial endotoxin test for new drugs was introduced, and especially focused on how to define the limit of bacterial endotoxins and carry out the interference test Conclusion: Bacterial endotoxin test provides useful bases in quality control and emergency test for new drugs

[Key words] New drugs; Bacterial endotoxin test; Interference test

新药以细菌内毒素检查方法代替既往的家兔热原检查法是一个趋势，在药害事件的应急处理中有一定的应用价值，这也符合国际上对动物实验的“3R”原则（优化、减少、替代）的要求。现行细菌内毒素检查方法是1968年美国科学家Levin和Bang所建立的鲎试验法[1]。从开展内毒素检查的现状来看，部分单位未能参照《中国药典》2010年版二部的要求进行实验和设计，本文着重介绍在建立新药细菌内毒素检查法中容易出现问题的细菌内毒素限值的确定及干扰试验这两个环节，力图为新药的质量控制以及应急检验提供有益的参考依据。

1 新药细菌内毒素检查限值的确认

11 细菌内毒素检查限值的计算公式

新药细菌内毒素检查限值（L）的确定是整个方法学建立的前提和基础，现在一般按照《中国药典》2010版二部附录XI E进行确定[2]。计算公式为L=K/M，K为人每千克体重每小时最大可接受的内毒素剂量，以EU/（kg・h）表示，非放射性注射剂K=5 EU/（kg・h），放射性注射剂K=25 EU/（kg・h），鞘内用注射剂K=02 EU/（kg・h）；M为人用每千克体重每小时的最大供试品剂量，成人体重按60 kg计算，体表面积为162 m2。部分抗肿瘤药物及抗生素的使用剂量以体表面积描述时，可将每平方米体表面积剂量乘以0027，即可转换为每千克体重剂量。

12 细菌内毒素检查限值的确认程序

首先根据所研究的新药品种说明书，通过查阅最新版《临床用药须知》等相关权威资料，得到人用每千克体重每小时的最大供试品剂量（M值）并求出L值，将所求得的L值与相关的质量标准（《美国药典》、《英国药典》、《日本药局方》、《欧洲药典》）以及国家食品药品监督管理局颁布的转正标准或注册标准散件中关于该品种的细菌内毒素限值进行参考对比。

还有一种方法是参考该品种的热原检查剂量（可视为M值），因为热原剂量的设置一般为成人临床用量的1～3倍，与常用的安全系数3～10倍较为接近，这种参考热原检查剂量的做法在以前颇为盛行，现在已逐渐少用。

13 细菌内毒素限值计算的常见误区

131 将成人日均用量误作最大用量 大多数情况下，说明书或资料往往只提供了某药的单次或每日用量，实践中不少人往往将单次用量误作最大用量进行限值计算，所得限值明显偏宽。众所周知，除极少数情况（急性、重症患者用药）下的单次用量可作为最大用量外，多数情况的日常用量换算成最大用量，还需考虑一定的安全系数（一般取3～10倍）。

132 误将每日总用量当成每次最大用量 只根据说明书或资料提供的某药的每日总用量，未考虑该药品总量的静脉滴注时间已经远不止1 h，这样求得的限值难于真实反映实际限值，因为M值是反映人用每千克体重每小时能接受的最大供试品剂量，而非全日的总用量。

133 对于大输液的细菌内毒素限值确定过于按部就班 没有考虑大输液的特殊要求，大输液的主药成分只占其中很少的一部分，实际多为葡萄糖注射液或生理盐水注射液，如果按主药成分计算细菌内毒素限值的话，容易偏宽，因而如无特殊情况一般将热原检查剂量10 ml/kg视为最大临床用量，将大输液细菌内毒素限值定为05 EU/ml。

134 忽视滴注时带入的外源性细菌内毒素 某些新药在临床使用时是溶于大输液进行滴注的。假设某抗生素药品的规格是1 g/支，其使用方法是溶于5%葡萄糖注射液250 ml，在1 h内滴注完毕。可参照下述方法计算该抗生素细菌内毒素限值，此时K=5 EU/（kg・h），因而60 kg的成人每小时体内可以接受细菌内毒素的最大量为300 EU，而在1 h内250 ml的5%葡萄糖注射液最大可带来125 EU的细菌内毒素，1 g的该药最多只能带入175 EU（125～300 EU）的细菌内毒素，因而该抗生素其细菌内毒素限值可定为0175 EU/mg。如果按常规计算的话，求得限值为0300 EU/mg。

135 没有考虑到主药外的其他成分 在细菌内毒素限值的确定过程中，特别是原料，要注意扣除主药外的其他成分（如金属离子：头孢噻肟钠中的钠，西司他丁钠中的钠），因为标准一般规定为每毫克中头孢噻肟或西司他丁所含的细菌内毒素量不得过多少EU，而制成的原料往往是含钠等其他成分的。

2 鲎试剂灵敏度复核试验

21 前期准备工作

试验所用的器皿需经处理，以去除可能存在的外源性内毒素。若使用塑料器械，如微孔板和与微量加样器配套的吸头等，应选用标明无内毒素并且对试验无干扰的器械。耐热器皿常用干热灭菌法（250℃，30 min以上）去除，部分物品也可采用其他确证不干扰细菌内毒素检查的适宜方法（如强酸强碱浸泡法），但需经过确证不干扰鲎试验检查。

22 灵敏度复核试验

当使用新批号的鲎试剂或试验条件发生了任何可能影响检验结果的改变时，应进行鲎试剂灵敏度复核试验。需要注意的是，当实测灵敏度λc在05λ～20λ（包括05λ～20λ，λ为鲎试剂灵敏度的标示值）时，方可用于细菌内毒素检查，并以标示灵敏度λ为该批鲎试剂的灵敏度，日常检验中部分检验者误将实测的灵敏度作为批鲎试剂的灵敏度来进行常规检查或干扰试验。

3 鲎试验检查的干扰试验

31 最大有效稀释倍数（MVD）的确认

MVD是指在试验中供试品溶液被允许达到稀释的最大倍数，计算公式为MVD=C・L/λ，式中L为供试品的内毒素限值，λ为鲎试剂的标示灵敏度（EU/ml），或是在光度测定法中所使用的标准曲线上最低的内毒素浓度；C为供试品液的浓度，当L以EU/ml表示时，则C等于10；如供试品为注射用无菌粉末或原料药，则MVD取1，可计算供试品的最小有效稀释浓度C=λ/L。

此处往往根据市售主要的鲎试剂灵敏度范围（003～100 EU/ml）来计算干扰试验中的有效浓度稀释范围。

32 干扰预试验

取本品1支（原料精密称取不低于10 mg的量），按照拟定内毒素限值，原料或注射用粉针加内毒素检查用水溶解并稀释至不超过MVD规定的系列浓度，注射液直接稀释至不超过最小有效稀释浓度的系列浓度，预试验时一般可取一个厂家灵敏度为0125 EU/ml或0250 EU/ml的鲎试剂，对供试品原液及其系列稀释液（供试品阴性对照，NPC）进行干扰检验，另外设立阳性对照（PC）、阴性对照（NC）、供试品阳性对照（PPC），每个浓度平行做两管，最终得出供试品（批号：20100802）在某浓度及以下浓度对鲎试验检查不产生干扰作用（PPC首次出现“++”的浓度）的结论。供试液的干扰预试验结果，见表1。

由表1可以看出，供试品在不高于20 mg/ml的浓度下不干扰鲎试验的检查。

33 正式干扰试验

按表2制备各系列溶液，使用的供试品溶液应为未检验出内毒素且不超过MVD的溶液，参照鲎试剂灵敏度复核试验项下操作，记录供试液的干扰情况。

只有当供试品溶液和阴性对照溶液的平行管都为阴性，且鲎试剂标示灵敏度的对照系列溶液的结果在鲎试剂灵敏度范围内时，试验方为有效，计算系列鲎试剂标示灵敏度的对照系列溶液和干扰试剂系列溶液的反应终点浓度的几何平均值（Es和Et）。当Es在05λ～20λ及Et在05Es～20Es时，认为供试品在该浓度下无干扰作用。若供试品溶液在小于MVD的稀释倍数下对试验有干扰，应将供试品溶液进行不超过MVD的进一步稀释，再重复干扰试验。

当进行新药的内毒素检查试验前或无内毒素检查项的品种建立内毒素检查法时，须进行干扰试验；当鲎试剂、供试品的处方、生产工艺改变或试验环境中发生了任何有可能影响试验结果的变化时，须重新进行干扰试验。

4 排除供试液干扰的方法[3]

41 样品稀释法

选用较高灵敏度的鲎试剂，将供试品进一步稀释（低于最大有效稀释倍数）后进行干扰试验，一般情况下大部分的干扰作用均能得到有效控制。

42 调节pH法

测定供试液的pH值，若不在鲎试剂的有效缓冲pH范围（60～80），可选用一定浓度的HCl或NaOH将pH值调节至60～80，但要注意应进行方法学验证（干扰试验），确保不干扰鲎试验检查，且对内毒素检查结果无影响。

43 超滤法

通过专用超滤系统，将影响内毒素检查的药物小分子杂质滤除，内毒素则留存于滤器内，滤器内加入相应的内毒素检查用水进行检查，可在几乎不影响内毒素浓度的前提下尽量避免小分子药物的干扰作用。

44 其他方法

微温保持加热法；使用去G因子鲎试剂或厂家提供的专用抗增液对样品进行稀释（此时须进行干扰试验）。

5 常规检查

使用最大有效稀释倍数（MVD） 并且已经排除干扰的供试品溶液来制备溶液供试品溶液和供试品阳性对照溶液，进行细菌内毒素的常规检测。

6 讨论

建立新药品种的细菌内毒素检查法，首先要结合临床最大用量确定其细菌内毒素限值，应用两个厂家的鲎试剂对3批样品进行鲎试验检查（普通凝胶法或动态浊度法定量试验），如结果能证实样品在不低于最大有效稀释浓度时对细菌内毒素检查无干扰作用，且样品的细菌内毒素常规检查结果为阴性，此时方可建立该品种的细菌内毒素检查法[4-7]。

根据临床最大用量规定及实验结果，将所研究的新药细菌内毒素限值定为每毫克主药（或每毫升）中含内毒素的量应小于若干EU。经干扰实验确证，该新药在某个浓度或低于该浓度时（但不低于最大有效稀释浓度MVC）对细菌内毒素检查无干扰作用。取本品3批，按拟定的标准检验，其内毒素检查结果均符合规定。

鲎(horseshoe crab)是一类与三叶虫 (现在只有化石)一样古老的动物。鲎的祖先出现在地质历史时期古生代的泥盆纪,当时恐龙尚未崛起，原始鱼类刚刚问世，随着时间的推移，与它同时代的动物或者进化、或者灭绝，而惟独只有鲎从4 亿多年前问世至今仍保留其原始而古老的相貌，所以鲎有“活化石”之称。

部分生物学家及鲎试剂厂家等已向国家建议设立鲎保护区及立法保护鲎。

鲎食性广，以动物为主，经常以底栖和埋木本的小型甲壳动物、小型软体动物、环节动物、星虫、海豆芽等为食，有时也吃一些有机碎屑。